噬菌體是感染細(xì)菌、真菌、藻類、放線菌等微生物的病毒的總稱，由于其擁有能夠引起宿主裂解的能力，因而被稱為噬菌體。噬菌體自1915年被學(xué)者弗德里克·特沃特發(fā)現(xiàn)以來，一直都被全世界的學(xué)者廣泛關(guān)注，開展了許多對于噬菌體的研究。其中，噬菌體療法作為一種致病菌的防控手段，很好的利用了噬菌體的優(yōu)勢，然而在一些發(fā)酵生產(chǎn)中，也不免會(huì)受到噬菌體污染導(dǎo)致發(fā)酵受到影響的問題，那么，在發(fā)酵生產(chǎn)這些過程中，如何預(yù)防和控制所面臨的噬菌體污染的問題呢？

當(dāng)發(fā)酵菌體受到噬菌體的感染后，通暢會(huì)導(dǎo)致發(fā)酵不正常進(jìn)行，甚至倒灌，主要有以下幾個(gè)方面的問題：①菌體的生長受到影響，發(fā)酵液的光密度(OD值)不上升或降低;②pH值異常，逐漸上升;③對氨的利用停止;④產(chǎn)生大量的泡沫，發(fā)酵液呈粘稠狀;⑤糖的消耗、溫升緩慢甚至停止;⑥顯微鏡下觀察能看到的菌體數(shù)量顯著減少，甚至找不到完整的菌體;⑦發(fā)酵周期延長，產(chǎn)物的生產(chǎn)量減少或停止產(chǎn)物。

發(fā)酵生產(chǎn)的過程中，如果收到噬菌體的侵染，會(huì)嚴(yán)重的影響工作的正常開展，在工作中更要嚴(yán)加防范，可以通過以下細(xì)節(jié)措施進(jìn)行落實(shí)：

①從菌種克隆及保存開始，克隆菌種的感受態(tài)菌體及其它物料要保證純凈沒有被污染，保存菌種的環(huán)境要潔凈避免菌種保存過程中被污染(特別注意，發(fā)生異常的菌種要立即和其它菌種分開保存)，且保存菌種的同時(shí)要保存質(zhì)粒以備菌種異常時(shí)立馬轉(zhuǎn)化新菌種;

②發(fā)酵時(shí)的培養(yǎng)基要保證沒有被噬菌體浸染，特別是酵母浸膏可通過培養(yǎng)噬菌體的方式去檢測其沒有被浸染;

③發(fā)酵場所要保持清潔，要定期進(jìn)行消毒處理。空氣系統(tǒng)要定期消毒并檢查，發(fā)酵種子制備的環(huán)境要保持潔凈，地溝、污水池等也要保持清潔，并定期消毒，補(bǔ)料設(shè)施要嚴(yán)格進(jìn)行消毒，定期檢測發(fā)酵罐，避免消毒死角的存在;

④發(fā)酵罐接種時(shí)要無菌操作，避免接種時(shí)污染;

⑤發(fā)酵過程取樣后的廢液要進(jìn)行收集滅菌處理，發(fā)酵過程的尾氣要處理后再排掉;

⑥發(fā)酵液離心后的上清要進(jìn)行滅菌處理，并和發(fā)酵空間隔開處理，發(fā)酵場所灑落的培養(yǎng)基等要及時(shí)清洗干凈。

一旦發(fā)酵菌侵染噬菌體后，就要從菌種、培養(yǎng)基、環(huán)境、發(fā)酵系統(tǒng)管路、地溝、污水池、排風(fēng)口等進(jìn)行全面的消毒排查，物理消毒方式通常很難將噬菌體消除，通常需要物理和化學(xué)方式相結(jié)合處理噬菌體污染。

必要時(shí)，應(yīng)暫停發(fā)酵培養(yǎng)工作，對整個(gè)發(fā)酵環(huán)境、管路、器材進(jìn)行消毒處理，可用紫外燈照射加過氧化氫干霧熏蒸的方式對整個(gè)發(fā)酵場所進(jìn)行消毒，在不影響生產(chǎn)的情況，可以停止發(fā)酵一個(gè)月的時(shí)間，讓發(fā)酵環(huán)境的菌株消除或減少到最低限度。

發(fā)酵生產(chǎn)環(huán)境或?qū)嶒?yàn)室空間進(jìn)行化學(xué)熏蒸，比較安全可靠的方法是使用過氧化氫氣體的方式，代替?zhèn)魅居泻τ卸镜募兹┭簟Ｄ壳傲餍泻捅唤邮艿氖?/span>VHP過氧化氫空間滅菌，其廣譜、高效、安全無害，無殘留的消毒方法成為新一代選擇。在解決發(fā)酵生產(chǎn)中預(yù)防和防治噬菌體感染問題具有重大意義，必要時(shí)可以定期的對環(huán)境空間全面熏蒸消毒。

來源：微生物安全與健康網(wǎng) 作者黃智超