一、技術(shù)原理：

試劑盒基于環(huán)介導(dǎo)恒溫?cái)U(kuò)增技術(shù)(LAMP)熒光法檢測(cè)，利用兩對(duì)特殊引物和具有鏈置換活性的Bst DNA聚合酶，使模板兩端引物結(jié)合處循環(huán)出現(xiàn)環(huán)狀單鏈結(jié)構(gòu)，引物順利與模板結(jié)合并進(jìn)行鏈置換擴(kuò)增反應(yīng)，實(shí)現(xiàn)在恒溫條件下（60-65℃）進(jìn)行連續(xù)快速擴(kuò)增。反應(yīng)體系中加入了顯色指示劑，陰陽(yáng)性結(jié)果顯色差異顯著，擴(kuò)增結(jié)束后可以通過(guò)觀察熒光顯色劑的顏色變化判讀結(jié)果，無(wú)需開(kāi)蓋避免了擴(kuò)增產(chǎn)物交叉感染性的可能性。LAMP是一種新型的恒溫核酸擴(kuò)增技術(shù)，該技術(shù)無(wú)需常規(guī)PCR中變性、退火、延伸等步驟不同溫度設(shè)計(jì)要求，只需提供一個(gè)適宜的恒定溫度即可，因此，與常規(guī)PCR相比，LAMP技術(shù)更適合現(xiàn)場(chǎng)高通量快速檢測(cè)，具有簡(jiǎn)單、快速、特異性強(qiáng)的特點(diǎn)。

二、應(yīng)用范圍

    恒溫?cái)U(kuò)增熒光法檢測(cè)技術(shù)可運(yùn)用于快速檢測(cè)食品中的沙門氏菌、金黃色葡萄球菌、志賀氏菌、單核增生李斯特菌、副溶血弧菌、大腸桿菌O157：H7、阪崎腸桿菌、小腸結(jié)腸耶爾森氏菌、銅綠假單胞菌、糞腸球菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌。

應(yīng)用于食品快速檢測(cè)有兩種方式：

1、快速篩查。對(duì)食品樣品快速增菌后，直接采用基因檢測(cè)試劑盒來(lái)快速篩查有沒(méi)可疑致病菌（對(duì)大多數(shù)致病菌在13小時(shí)內(nèi)即可完成篩查）；

2、快速鑒定。對(duì)食品樣品進(jìn)行增菌，平板分離，使用基因檢測(cè)試劑盒對(duì)可疑菌落進(jìn)行快速準(zhǔn)確的鑒定（1小時(shí)內(nèi)完成鑒定）。

三、快速篩查食品中致病菌操作流程

四、快速鑒定可疑菌落操作流程

五、環(huán)凱恒溫?cái)U(kuò)增試劑盒特點(diǎn)

操作簡(jiǎn)單：通過(guò)幾部加樣后，60-65℃范圍內(nèi)恒溫條件下即可完成擴(kuò)增。

使用便捷：一管式凍干，免去繁瑣的配制步奏。

儀器簡(jiǎn)單：擴(kuò)增條件簡(jiǎn)單，能提供恒溫裝置即可。

特異性高：比傳統(tǒng)PCR靈敏度高10-100倍，可檢測(cè)5-20個(gè)拷貝。

快速判讀：使用合適的增菌液收集到足夠菌體后，40-60分鐘內(nèi)可完成檢測(cè)，肉眼觀察顏色變化即可判讀結(jié)果。全部檢驗(yàn)流程僅需約13h（詳細(xì)檢驗(yàn)流程參見(jiàn)說(shuō)明書(shū)）。

六、環(huán)凱恒溫?cái)U(kuò)增試劑盒組成

七、環(huán)凱恒溫?cái)U(kuò)增試劑盒操作指南

八、恒溫?cái)U(kuò)增試劑盒產(chǎn)品列表 

九、恒溫?cái)U(kuò)增快速檢測(cè)所需配套增菌培養(yǎng)基列表

       拾、恒溫?cái)U(kuò)增快速檢測(cè)需要配套的儀器及耗材列表