生產(chǎn)過程環(huán)境微生物污染水平的控制對食品藥品成品質(zhì)量的影響至關(guān)重要，因此，我們必須對生產(chǎn)過程進行風(fēng)險評估和分析，對關(guān)鍵控制點進行微生物檢測監(jiān)控，以確保產(chǎn)品在生產(chǎn)過程中不被污染，保證成品質(zhì)量。

根據(jù)《GMP藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》、《GB 14881-2013 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品生產(chǎn)通用衛(wèi)生規(guī)范》等相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，生產(chǎn)過程環(huán)境微生物的主要監(jiān)控指標(biāo)有空氣沉降菌、空氣浮游菌及表面微生物。

1.空氣沉降菌

通過自然沉降原理收集在空氣中的活微生物粒子，通過專用的培養(yǎng)基，在適宜的生長條件下繁殖到可見的菌落數(shù)。沉降菌的采樣屬于被動式采樣，反映最終落在地面或物體表面的灰塵中攜帶的微生物。

檢測標(biāo)準(zhǔn)：

GB/T 18204.3-2013 公共場所衛(wèi)生檢驗方法 第3部分：空氣微生物

GB/T 16294-2010 醫(yī)藥工業(yè)潔凈室（區(qū)）沉降菌的測試方法

檢測方法：

常用的檢驗方法是沉降平板法，即測定在一定時間內(nèi)從空氣中降落到單位面積地面上的微生物個數(shù)。操作步驟：將融化的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基或大豆酪蛋白瓊脂培養(yǎng)基（霉菌監(jiān)測用沙氏培養(yǎng)基）倒入90mm無菌培養(yǎng)皿中制成平板（或購買商品化沉降皿），按標(biāo)準(zhǔn)要求布設(shè)在監(jiān)測點上（監(jiān)測點按標(biāo)準(zhǔn)選擇和布局），打開皿蓋暴露在監(jiān)測環(huán)境中5～30min（動態(tài)監(jiān)測不大于4小時），讓空氣中的微生物降落在平板表面，蓋好皿蓋，然后倒置放入培養(yǎng)箱中，培養(yǎng)48h后計菌落數(shù)（SDA培養(yǎng)5天）。

環(huán)凱牌三層無菌包裝沉降皿

2.空氣浮游菌

用計數(shù)濃度法，即通過收集懸游在空氣中的生物性粒子，通過專用的培養(yǎng)基，在適宜的生長條件下繁殖到可見的菌落數(shù)。浮游菌的采樣屬主動采樣，反映潔凈區(qū)內(nèi)空氣中生物粒子的濃度。

檢測標(biāo)準(zhǔn)：

《GB/T16293-2010 醫(yī)藥工業(yè)潔凈室（區(qū)）浮游菌的測試方法》

檢測方法：

常用撞擊式浮游微生物采樣器，使空氣通過狹縫或小孔產(chǎn)生高速氣流，從而將懸浮在空氣中的微生物（浮游菌）采集到專門的平板培養(yǎng)基上，經(jīng)實驗室培養(yǎng)后得到進行菌落計數(shù)。

操作步驟：將浮游微生物采樣器放置在監(jiān)測點上，卸下多孔采樣頭和保護蓋，用75%酒精對多孔采樣頭和保護蓋、培養(yǎng)皿座及外表進行擦拭消毒，然后將預(yù)先制作好裝有TSA或SDA培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿（或購買商品化平板）放置于培養(yǎng)皿座上，并將培養(yǎng)皿調(diào)整至水平，裝好多孔采樣頭，設(shè)定采樣參數(shù)，開機進行采樣。采樣結(jié)束后，打開多孔采樣頭，取出培養(yǎng)皿，蓋回原培養(yǎng)皿蓋，貼上標(biāo)簽或?qū)懮暇幪?，置于已到達設(shè)定溫度的恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)，進行倒置培養(yǎng)。

環(huán)凱牌浮游微生物采樣器

3.表面微生物

表面微生物，指在生產(chǎn)過程中，各物體表面存在的微生物，通過與產(chǎn)品直接或間接接觸而轉(zhuǎn)移到產(chǎn)品中，從而影響了產(chǎn)品的安全性和有效性。接觸面分直接接觸面和間接接觸面，直接接觸的表面有：車間內(nèi)的空氣、加工設(shè)備、工器具、操作臺案、轉(zhuǎn)送帶、儲水池、內(nèi)包裝物料、加工人員的手或者手套和工作服等等； 間接接觸的表面有：未經(jīng)清洗消毒的冷庫、車間的門把手、操作設(shè)備的按鈕、車間內(nèi)的開關(guān)、墻壁等。

檢測標(biāo)準(zhǔn)：

2015版中國藥典

GB 15979-2002 一次性使用衛(wèi)生用品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)

GB 14934-2016 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 消毒餐（飲）具

GB 15982-2012 醫(yī)院消毒衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)

檢測方法：

常用的表面微生物檢測方法有：表面沖洗法；棉簽擦拭法；接觸平皿法。

棉簽擦拭法：檢測物體表面的取樣面積一般為25cm2，人體表面擦拭至少應(yīng)包括雙手手指印、頭、口罩、肩部、前臂、手腕和腿等。棉簽擦拭法特別適用于不規(guī)則表面，取樣時，手握住拭子柄，以30°角與取樣表面接觸，采用S型或Z型緩慢并旋轉(zhuǎn)棉簽充分擦拭。

環(huán)凱牌表面微生物采集拭子

接觸平皿法：接觸平皿法是將接觸皿直接接觸需采樣的物體表面，接觸時間一般在10s左右，培養(yǎng)后便會長出菌落。因為該方法容易操作而且可以定量，所以，被廣泛使用。但是，這個測試只適用于平整光滑的表面。取樣后，需用蘸有質(zhì)量分數(shù)為75%的乙醇的紗布擦拭被取樣表面，以除去殘留。將取樣后并做好標(biāo)記的接觸碟置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，培養(yǎng)箱的參數(shù)一般設(shè)定在30～35℃，培養(yǎng)72h后計數(shù)。

環(huán)凱牌三層無菌包裝接觸皿