一、技術原理:
試劑盒基于恒溫熒光法檢測,利用兩對特殊引物和具有鏈置換活性的Bst DNA聚合酶,使模板兩端引物結合處循環(huán)出現(xiàn)環(huán)狀單鏈結構,引物順利與模板結合并進行鏈置換擴增反應,實現(xiàn)在恒溫條件下(60-65℃)進行連續(xù)快速擴增。
反應體系中加入了顯色指示劑,陰陽性結果顯色差異顯著,擴增結束后可以通過觀察熒光顯色劑的顏色變化判讀結果,無需開蓋避免了擴增產物交叉感染性的可能性。恒溫熒光法是一種新型的恒溫核酸擴增技術,該技術無需常規(guī)PCR中變性、退火、延伸等步驟不同溫度設計要求,只需提供一個適宜的恒定溫度即可,因此,與常規(guī)PCR相比,恒溫熒光法技術更適合現(xiàn)場高通量快速檢測,具有簡單、快速、特異性強的特點。
二、環(huán)凱恒溫熒光法試劑盒特點
快速簡便將酶、引物等反應組分混勻后進行干粉化處理,增加試劑穩(wěn)定性,使用時減少溶液配制步驟,更為便捷,整個檢測反應可在1 h內完成;
判讀簡單反應前加入顯色指示劑,反應后通過肉眼觀察反應液顏色變化或者經熒光監(jiān)測儀器跟蹤熒光圖譜的變化判讀結果,直觀方便,且可有效避免反應后開蓋造成的氣溶膠污染。
特異性高利用靶基因序列上的多個獨立區(qū)域設計多條引物,保證擴增反應的高度特異性;
靈敏度高最低檢驗限達到18 CFU/Test;
三、環(huán)凱恒溫熒光法試劑盒組成
1)試劑盒組成
2)檢測結果
四、環(huán)凱恒溫熒光法試劑盒操作流程
五、創(chuàng)傷弧菌快速篩選操作流程
六、需要配套的儀器及耗材列表