一、技術(shù)原理:
試劑盒基于恒溫?zé)晒夥z測,利用兩對特殊引物和具有鏈置換活性的Bst DNA聚合酶,使模板兩端引物結(jié)合處循環(huán)出現(xiàn)環(huán)狀單鏈結(jié)構(gòu),引物順利與模板結(jié)合并進(jìn)行鏈置換擴(kuò)增反應(yīng),實現(xiàn)在恒溫條件下(60-65℃)進(jìn)行連續(xù)快速擴(kuò)增。
反應(yīng)體系中加入了顯色指示劑,陰陽性結(jié)果顯色差異顯著,擴(kuò)增結(jié)束后可以通過觀察熒光顯色劑的顏色變化判讀結(jié)果,無需開蓋避免了擴(kuò)增產(chǎn)物交叉感染性的可能性。恒溫?zé)晒夥ㄊ且环N新型的恒溫核酸擴(kuò)增技術(shù),該技術(shù)無需常規(guī)PCR中變性、退火、延伸等步驟不同溫度設(shè)計要求,只需提供一個適宜的恒定溫度即可,因此,與常規(guī)PCR相比,恒溫?zé)晒夥夹g(shù)更適合現(xiàn)場高通量快速檢測,具有簡單、快速、特異性強(qiáng)的特點。
二、環(huán)凱恒溫?zé)晒夥ㄔ噭┖刑攸c
快速簡便將酶、引物等反應(yīng)組分混勻后進(jìn)行干粉化處理,增加試劑穩(wěn)定性,使用時減少溶液配制步驟,更為便捷,整個檢測反應(yīng)可在1 h內(nèi)完成;
判讀簡單反應(yīng)前加入顯色指示劑,反應(yīng)后通過肉眼觀察反應(yīng)液顏色變化或者經(jīng)熒光監(jiān)測儀器跟蹤熒光圖譜的變化判讀結(jié)果,直觀方便,且可有效避免反應(yīng)后開蓋造成的氣溶膠污染。
特異性高利用靶基因序列上的多個獨立區(qū)域設(shè)計多條引物,保證擴(kuò)增反應(yīng)的高度特異性;
靈敏度高最低檢驗限達(dá)到18 CFU/Test;
三、環(huán)凱恒溫?zé)晒夥ㄔ噭┖薪M成
1)試劑盒組成
2)檢測結(jié)果
四、環(huán)凱恒溫?zé)晒夥ㄔ噭┖胁僮髁鞒?/strong>
五、創(chuàng)傷弧菌快速篩選操作流程
六、需要配套的儀器及耗材列表